「これって相分離？」と悩むあなたに．精製やイメージング，動態評価，定量解析など，実績ある先駆者たちによる細胞内外での解析プロトコールを結集．さらに頻発トラブルへの対応もQ＆A形式で多数掲載！ 序 レビュー編 I．概論 1 群れることの意味─非膜オルガネラの生理機能 II．基礎知識 2 アミノ酸溶液とタンパク質溶液の基本的な性質 3 Low-complexity配列による相分離・相転移機構 4 細胞内相分離におけるRNAの役割 プロトコール編 I．in vitro（細胞外） 1 精製Atgタンパク質を用いたin vitro液滴形成と蛍光観察 2 精製FUSによる相分離の顕微鏡観察と温度依存性解析 3 DNA/タンパク質相分離の再現実験 4 人工細胞中での相分離観察 5 リコンビナントlow-complexityドメインの精製法 6 ハイドロゲル結合実験によるlow-complexity配列の線維形成能の評価 7 Low-complexity配列に特異的に作用する低分子化合物 〜biotinylated isoxazoleと1，6-hexanediol 8 ラマン顕微鏡による相分離の定量解析 II．in vivo（細胞内） 9 細胞内液滴の形成観察とFRAPによる動態観察 10 低酸素条件下で形成する代謝酵素集合体の観察 11 タンパク質クラウディング状態の蛍光プローブによる測定 12 SNAP-tagを用いた一分子イメージング法 13 近位ビオチン標識法 14 観察した液滴の画像解析による定量評価 15 過剰発現が引き起こす相分離構造と細胞毒性の評価 16 オプトジェネティクスによる相転移の操作 III．in silico 17 液滴研究に関連したデータベースと解析プログラム 発展編 1 CARS顕微鏡 〜Lipid dropletsからLiquid dropletsの可視化へ 2 新たな液中走査電子顕微鏡の開発と生物試料の直接観察 3 中性子散乱 4 放射光円偏光二色性分光法による液 - 液相分離の観測 5 分子シミュレーションで理解する相分離のメカニズム 索引